Kommt es im analytischen Szenario darauf an, möglichst alle Bestandteile einer Probe zu identifizieren und/oder die Konzentration zu bestimmen, so soll im präparativen Fall oft nur ein oder wenige Produkte mit einer bestimmten Reinheitsvorgabe gewonnen werden. Dabei mit möglichst hohem Injektionsvolumen und niedrigem Lösungsmittelverbrauch auszukommen, ist beim präparativen Arbeiten wichtig.
| Parameters | Analytical HPLC | Preparative HPLC |
|---|---|---|
| Separation goal: | as many peaks as possible, baseline-separated | just interested in the desired product peak |
| Sample volume: | as little as possible (1 to 20 µl per injection) | as much as possible without peak overlap > 20 µl |
| Column inner diameter: | 1 to 4 mm | > 4 mm |
| Particle size: | < 5 µm | > 5 µm |
| Flow rate: | 1.0 ml/min | 5 to 5000 ml/min |
| Detection: | as sensititve as possible | monitoring, saturation can be problematic |
| Peak shape: | Gauß shape for analyzability | no matter, as long as product peak is clean |
| Fraction collection: | no | yes (automatized) |
| Solvent cost: | low | high |
| Solvent recovery: | no | desirable, recycling |
| Gradient: | optimizes separation and speed | interferes with solvent recycling |
Welche Geräte werden benötigt?
An Ihrer HPLC-Anlage muss eine Sammelmöglichkeit für die eluierenden Peaks vorhanden sein. Das kann ein Fraktionssammler sein, um den ganzen Lauf zu fraktionieren oder ein kostengünstiges Multi-Port-Multi-Positions-Schaltventil mit üblicherweise 6 bis 16 Schaltstellungen. Rechnen Sie mindestens eine Schaltposition für Lösungsmittel-Recycling und eine für Abfall ab, wenn Sie die Zahl der Peak-Fraktionen planen. Besser, aber auch aufwendiger, ist ein zusätzliches Bypass-Ventil.
Einstieg ins HPLC-Aufreinigen ...
Das AZURA® Prep Compact System bietet den perfekten Einstieg in die semi-präparative HPLC. Mit manueller Injektion und einer isokratischen Pumpe für Flussraten bis maximal 50 ml/min können pro Lauf bis zu einige hundert Milligramm Probe aufgereinigt werden. Das System verfügt über einen UV-Detektor mit variabler Wellenlänge. Die Sammlung der Fraktionen erfolgt vom Detektorsignal getriggert über ein 12-Port-Multipositionsventil. Es wird wie alle anderen Komponenten von der leicht zu bedienenden Software PurityChrom® gesteuert.
- Sehr kompakt, mehrere Systeme sind stapelbar
- UV-Detektor mit variabler Wellenlänge
Andere Detektoren wie RI oder MS kombinierbar
